Post by alamin4470 on Aug 13, 2023 5:40:29 GMT -5
匹配，但这些被纳入作为对照，以验证试剂是否适当发挥作用，以支持双 KO 细胞完全缺乏 Neu5Gc 和 Gal 抗原的结论。 成纤维细胞从一号胎儿中生长出来，并用于 SCNT 来产生第二次妊娠，从而产下四只可存活的仔猪和一只死产的双 KO 仔猪（表 1 ）。它们生长正常，与野生型或 GGTA1-KO 猪没有明显的表型差异。这些分使用的细胞和组织的来源（图 3 A）。GGTA1 和 CMAH 基因座的破坏在第二次妊
娠的四头活猪中得到了验证（图 3 B）。对多个组织和细胞的电话号码列表表共聚焦显微镜和流式细胞术分析证实野生型猪同时显示 Gal 和 Neu5Gc；GGTA1-KO猪仅显示Neu5Gc；而双敲除猪则缺乏这两种修饰（图 4A-C）。 详细信息位于图片后面的标题中 图3 在图查看器中打开 微软幻灯片软件 可存活的双 KO 仔猪。(A) 3 个月大的双 KO 仔猪的照片。(B) 单磷酸胞苷-N-乙酰神经氨酸羟化酶 (CMAH) 和 GGTA1 基因的 DNA 序列突变。 详细信息位于图片后面的标题
中 图4 在图查看器中打开 微软幻灯片软件 转基因猪碳水化合物表位分析。使用 (A) 抗 Neu5Gc 抗体（青色）和 (B) IB4 凝集素染色的 2 个月大的野生型、8 个月大的 GGTA1-KO 和 2 天大的双 KO 猪组织的共聚焦显微镜观察（红色的）。(C) 用抗 Neu5Gc 抗体（蓝色）和 IB4 凝集素（红色）标记的外周血单核细胞 (PBMC) 的流式细胞术分析。未染色的 PBMC 是 IB4 凝集素的阴性对照，并且在抗 Neu5